摘要：目的探讨人脐带来源间充质干细胞（hUC—MSCs）体外培养的最佳方法。方法采用组织块贴壁法分离培养hUC—MSCs，记为初次培养组。将原代培养瓶中的培养液及组织离心，重新分成再次培养组织组、再次培养混合组和再次培养纯液组进行再次培养。观察四组原代细胞的细胞形态、获得时间和细胞得率；MTT法绘制细胞生长曲线，流式细胞仪检测细胞周期及免疫表型。结果初次培养组、再次培养组织组、再次培养混合组、再次培养纯液组获取细胞的平均时间分别为（15±0．45）d、（7±0．30）d、（84±0．25）d、（8±0．25）d。每个T75培养瓶可获取的第1代细胞数分别为（4．0±0．50）×10^5、（9．0±0．55）×10^5、（15．0±0．20）×10^5、（7．04±0．33）×10^5个。倒置显微镜下观察四组细胞为形态相对均一的梭形贴壁细胞，呈平行排列生长或旋涡状生长。四组细胞的生长曲线、增殖活性、表面标记物检测均无明显差异。结论对脐带问充质干细胞的原代培养体系进行再次培养，可在短时间内扩增出大量原代细胞。

关键词：间充质干细胞 脐带 细胞培养 

单位：中国人民解放军海军总医院 北京100000