摘要：目的：构建靶向Livin基因的短发夹RNA（ shRNA）真核表达载体，探讨其对肺癌A549细胞Livin表达及细胞增殖的影响。方法培养人肺癌A549细胞株，分为实验组、质粒对照组及空白对照组。设计并构建靶向Livin基因的shRNA真核表达载体pSD11-Livin，以pSD11-livin载体转染实验组细胞，以pSD11-NON质粒转染质粒对照组细胞，空白对照组不行转染处理。采用荧光定量PCR法检测各组细胞Livin mRNA的表达，Western blot法检测各组细胞Livin蛋白表达，MTT法检测各组细胞生长抑制率。结果测序分析证实，针对Livin基因的shRNA真核表达载体构建成功。转染后48 h，实验组、质粒对照组及空白对照组Livin mRNA相对表达量分别为0．514±0．102、0．879±0．093及1．002±0．032，实验组Livin mRNA相对表达量低于质粒对照组及空白对照组（ P均＜0．05）。转染后72 h，实验组、质粒对照组及空白对照组Livin蛋白相对表达量分别为0．295±0．073、0．661±0．066及0．732±0．059，实验组Livin蛋白相对表达量低于质粒对照组及空白对照组（P均＜0．05）。实验组转染后不同时间的生长抑制率均高于质粒对照组及空白对照组（ P均＜0．05）。结论 Livin shRNA真核表达载体构建成功，转染肺癌A549细胞后可抑制Livin mRNA及蛋白的表达，抑制细胞的增殖。

关键词：livin基因 rna干扰 非小细胞肺癌 

单位：山东省职业卫生防治研究院 济南250021