摘要：目的探讨乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因过表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期的MDA-MB-435S细胞,将其随机分为三组,阳性转染组将真核表达质粒pc DNA3.1/BCRP经双酶切和测序鉴定后转染MDA-MB-435S细胞,阴性对照组同步转染2μg pc DNA3.1的空质粒,空白对照组用2 m L原培养液正常培养。采用RT-PCR法和Western blotting法检测BCRP mRNA和蛋白表达。转染后48 h,每组再分设7个丝裂霉素（MMC）浓度（0.01、0.10、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00μmol/L）组,每个浓度组3个复孔,加入相应浓度的MMC 10μL,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果重组真核表达质粒pc DNA3.1/BCRP经双酶切和测序证实该质粒构建正确;阳性转染组转染24、48、72 h后,MDA-MB-435S细胞中BCRP mRNA和蛋白表达均明显增加（P均〈0.05）;与阴性对照组比较,阳性转染组转染pc DNA3.1/BCRP 48 h后,细胞凋亡率无统计学差异（P〉0.05）;CCK-8结果显示,化疗药物MMC作用24 h后,与阴性对照组比较,阳性转染组转染pc DNA3.1/BCRP 48h后细胞存活率显著增加（P〈0.05）。结论 BCRP过表达可促进人乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖,但对细胞凋亡无明显影响。

关键词：乳腺癌 乳腺癌耐药蛋白 细胞增殖 细胞凋亡 

单位：中国医科大学药学院; 沈阳110001