摘要：目的观察多西他赛联合BEZ235不同作用方式对Kras基因突变的A549细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法体外培养Kras基因突变的人肺腺癌A549细胞,采用不同浓度多西他赛（2.5、5、10、20、40μg/L）和BEZ235（1.25、2.5、5、10、20μmol/L）干预24、48、72 h;MTT法检测细胞增殖抑制率,确定BEZ235的最佳干预浓度为17.5μmol/L、多西他赛的最佳干预浓度为15.3μg/L,二者最佳干预时间均为48 h。另取人肺腺癌A549细胞,随机分为对照组（耐药组）、多西他赛单药组、BEZ235单药组、BEZ235同步多西他赛组（两药同时应用）、多西他赛序贯BEZ235组（给予多西他赛24 h改用BEZ235 24 h）、BEZ235序贯多西他赛组（给予BEZ235 24 h改用多西他赛24 h）,均给予最佳干预时间及最佳干预浓度,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测pAKT、pERK蛋白表达。结果对照组、多西他赛单药组、BEZ235单药组、BEZ235同步多西他赛组、多西他赛序贯BEZ235组、BEZ235序贯多西他赛组A549细胞凋亡率逐渐升高（P均〈0.05）,pAKT蛋白相对表达量逐渐降低（P均〈0.05）。BEZ235单药组pERK蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但均高于其他各组（P均〈0.05）。结论多西他赛和BEZ235不同联合作用方式作用下均可促进Kras基因突变的A549细胞凋亡,以BEZ235序贯多西他赛效果最好;降低pAKT及pERK表达,协同抑制PI3K/AKT/mTOR和Raf/MEK/ERK通路可能是其作用机制。

关键词：肺癌 多西他赛 bez235 kras基因 a549细胞 

单位：郑州大学第二附属医院; 郑州450000