摘要：目的分析人成骨肉瘤MG63细胞中热休克蛋白70（HSP70）、细胞骨架蛋白（Ezrin）的表达对该细胞凋亡和增殖的影响。方法首先在有双启动子的质粒载体p GFP-V-RS中构建能够表达HSP70和Ezrin蛋白shRNA的载体并重组质粒,将质粒转染入MG63细胞,分为联合表达组、单纯shRNA组、空白载体组,筛选稳定表达细胞培养增殖,采用RT-PCR及Western blotting法检测这两种蛋白基因表达情况与蛋白水平;Western blotting法检测凋亡相关蛋白,使用流式细胞术及噻唑蓝比色法分别检测第1、3、5、7天细胞凋亡及增殖率。结果联合表达组Ezrin mRNA及Ezrin蛋白合成量低于空白载体组和单纯shRNA组,HSP70 mRNA及HSP70蛋白合成量高于空白载体组和单纯shRNA组（P均〈0.01）,HSP70和Ezrin联合表达的MG63细胞构建成功。低表达Ezrin和高表达HSP70的载体质粒构建成功。联合表达组MG63细胞凋亡率（23.94%±0.48%）较空白载体组（10.96%±0.25%）高（P〈0.01）,增殖速度（308.67%±2.91%）较单纯shRNA组（394.80%±2.63%）慢（P〈0.01）;与空白载体组比较,单纯shRNA组、联合表达组第3、5、7天细胞增殖率降低,抑制率升高（P均〈0.01）。与单纯shRNA组比较,联合表达组第3、5、7天细胞增殖率低,抑制率低（P均〈0.01）。结论高表达的HSP70和低表达的Ezrin在促进骨肉瘤细胞凋亡的同时减缓其增长速度。

关键词：骨肉瘤细胞 热休克蛋白质70 ezrin蛋白 shrna 

单位：平顶山市第一人民医院; 河南平顶山467000; 平顶山市中医院