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siRNA抑制X连锁凋亡抑制蛋白基因对人HeLa细胞凋亡及周期的影响

唐薇薇; 郑洪; 厉国慧; 王琳琳 山东医药 2016年第33期

摘要:目的:探讨特异性 siRNA 对宫颈癌 Hela 细胞 X 连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因的抑制作用及其抑制后细胞凋亡和细胞周期的变化。方法设计合成 XIAP 特异性抑制 siRNA,并将 Hela 细胞分成4组,即观察组(pG-PU6/GFP/Neo /XIAP -siRNA 转染细胞)、空白组(未加 siRNA 及转染试剂)、NC 组(阴性对照,为所选目的序列被无序打乱的 siRNA 转染)、Mock 组(转染试剂对照,加转染试剂未加 siRNA)。RT-PCR 法检测各组 XIAP mRNA 表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况及细胞周期变化。结果转染48、72 h,观察组 XIAP mRNA 表达分别为20.20±0.10、19.99±0.14,空白组分别为21.43±0.04、20.95±0.15,两组比较均有统计学差异(P 均<0.05)。转染48 h,观察组、空白组细胞凋亡率分别为(28.91±0.12)%、(9.73±0.02)%;转染72h,观察组、空白组细胞凋亡率分别为(37.29±0.10)%、(10.62±0.04)%;观察组细胞凋亡率均高于空白组(P 均<0.05)。空白组、Mock组、NC 组间 XIAP mRNA 表达、细胞凋亡率比较均无统计学差异(P 均>0.05)。与空白组相比,观察组转染48、72 h 后 G0~G1期细胞增多而 S 期细胞减少(P 均<0.05)。结论特异性 XIAP-siRNA 可有效沉默宫颈癌 Hela 细胞XIAP 基因,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。

关键词:宫颈肿瘤hela细胞x连锁凋亡抑制蛋白微小干扰irna

单位:遵义医学院; 贵州遵义563003; 遵义医学院附属医院

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