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miRNA-21对脂多糖诱导大鼠心肌细胞增殖的影响及其机制探讨

王圆; 黄燕; 杨丹英; 姜虹 山东医药 2016年第38期

摘要:目的观察微小RNA-21(miRNA-21)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法取大鼠心肌细胞H9C2,用LPS10μg/mL处理0、6、12h,RT—PCR法检测细胞miRNA-21表达。将对数生长期的H9C2细胞随机分为4组,A组不处理,B组用LPS10μg/mL处理12h;C、D组分别转染对照质粒(NC—miRN段)、miRNA-21抑制质粒(miRNA-21 antagomiR),培养48h后再用LPS10μg/mL处理12h。采用CCK-8法检测各组H9C2细胞增殖的OD值,Western blot法检测H9C2细胞中Bax、Bcl-2蛋白,分光光度法检测H9C2细胞中Caspase-3活性。结果LPS处理0、6、12h时,H9C2细胞miRNA-21相对表达量分别为1.05±0.03、12.95±0.08、19.62±0.12;与0h时比较,6、12h时H9C2细胞miRNA-21相对表达量升高(P均〈0.01)。A、B、C、D组H9C2细胞增殖的OD值分别为1.08±0.03、0.71±0.03、0.70±0.01、0.85±0.02,A组〉D组〉B、C组,P均〈0.01。与A组比较,B、C、D组H9C2细胞中Bax相对表达量增加、Bcl-2相对表达量降低(P均〈0.01);与B、C组比较,D组H9C2细胞中Bax相对表达量减少、Bcl-2相对表达量增加(P均〈0.01)。B、C、D组H9C2细胞Caspase-3活性分别为1.13±0.08、1.10±0.14、0.57±0.06,D组H9C2细胞Caspase-3活性低于B、C组,P均〈0.01。结论LPS可致心肌细胞损害过程miRNA-21表达增加,抑制miRNA-21表达可减轻LPS对心肌细胞增殖的抑制作用;其机制为抑制miRNA-21表达可下调Bax蛋白、上调Bcl-2蛋白表达,抑制Caspase-3活性,从而减轻细胞凋亡。

关键词:微小核糖核酸21脂多糖心肌细胞细胞增殖凋亡相关蛋白

单位:上海交通大学医学院附属第九人民医院; 上海200011; 上海交通大学医学院附属新华医院

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