摘要：目的制备包载髓样细胞白血病1（Mcl-1）基因的小干扰RNA（siRNA）囊泡（Mcl-1基因siRNA囊泡）,并观察其对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用。方法 1Mcl-1基因siRNA囊泡制备及其功能鉴定：采用乙醇注入法制备空白囊泡,将其分别和FAM标记（荧光标记物,可在显微镜下被观察）的正常siRNA（FAM-siRNA）、Mcl-1基因siRNA溶液涡旋、静电复合,室温静置30 min,获得包载FAM-siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA囊泡。采用马尔文激光粒度仪测定空白囊泡、包载FAM-siRNA囊泡的平均粒径和zeta电位;采用超滤离心-荧光分光光度法测定包载FAM-siRNA囊泡的荧光强度并计算包封率;观察FAM-siRNA释放情况,计算FAM-siRNA释放率。取HepG2细胞分为A、B、C、D组,培养24 h时C组加入包载FAM-siRNA囊泡,D组加入包载FAM-siRNA囊泡和Lipofectamin转染试剂,B组加入游离FAM-siRNA,A组不做任何处理,继续培养6 h时观察各组细胞FAM-siRNA摄取情况。2转染Mcl-1基因siRNA囊泡对HepG2细胞的生长抑制作用观察：取HepG2细胞,分为1、2、3、4、5组,5×105/孔接种于6孔板,每组3个复孔。培养24 h时1、2、3、4组分别加入游离Mcl-1 siRNA、包载FAM-siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA＋Lipofectamin转染试剂,5组不做任何处理。培养78 h时检测各组细胞Mcl-1蛋白。取HepG2细胞分为甲、乙、丙、丁组及对照组,培养24 h时甲、乙、丙、丁组分别加入终浓度为1、10、50、100、200 nmol/L的游离Mcl-1基因siRNA、包载FAM-siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA囊泡、Mcl-1基因siRNA＋Lipofectamin转染试剂,对照组不做任何处理。培养48 h时观察各组细胞生存情况,计算细胞存活率。结果空白囊泡、包载FAM-siRNA囊泡粒径、zeta电位相比,P均〈0.01。包载FAM-siRNA囊泡包封率82.3%±2.1%。培养1、3、6、12、24、36、48、72、96 h时FAM-siRNA囊泡的FAM-siRNA释放率分别为13.5%±2.8%、26.1%±1.6%、38.0%±2.9%、50.6%±2.3%、56.8%±2.9%、5

关键词：髓样细胞白血病1 小干扰rna rna干扰 囊泡 肝癌 

单位：广西壮族自治区妇幼保健院; 南宁530003; 广西壮族自治区人民医院; 广西医科大学药学院