摘要：目的：探讨 miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法用 Target scan human 在线软件预测miR-185调控的靶基因；采用荧光素酶报告载体系统检测 miR-185对 M2型丙酮酸激酶（PKM2）3′UTR 荧光酶活性的影响；蛋白质印迹法检测 miR-185对 PKM2蛋白表达的影响。将肝癌 HepG2细胞分为观察1组、对照1组、观察2组、对照2组、观察3组。观察1组转染 miR-185 mimics，对照1组转染 Scramble；观察2组转染 PKM2-siRNA，对照2组转染 Control-siRNA；观察3组转染 miR-185 inhibitors 与 PKM2-siRNA。采用 MTT 法检测上述5组细胞增殖能力，采用 AnnexinV-FITC 和 PI 染色法检测上述5组细胞凋亡率。结果在线预测软件发现 miR-185与 PKM2的3′UTR 有共同的结合位点，荧光素酶报告载体系统显示在 HepG2细胞中 miR-185能抑制 Wild-PKM2报告质粒组荧光素酶的活性，Western blotting 结果显示 miR-185能下调 HepG2细胞中 PKM2蛋白表达，证实 PKM2是 miR-185直接调控的靶基因；MTT 结果显示，观察1组与观察2组 HepG2细胞 OD 值分别为0．446±0．034、0．472±0．028，与对照1组（0．649±0．041）和对照2组（0．610±0．023）相比，差异均有统计学意义（P 均＜0．05）。观察3组的 OD值为0．606±0．016，与对照1组或对照2组相比，差异均无统计学意义；凋亡实验结果显示，观察1组与观察2组HepG2细胞凋亡率分别为（29．13±2．04）％、（27．46±1．95）％，对照1组、对照2组分别为（8．76±0．53）％、（8．51±0．47）％，观察1组、观察2组与对照1组、对照2组比较，P 均＜0．05。观察3组的凋亡率为（9．47±0．61）％，与对照1组或对照2组相比，差异均无统计学意义。结论 miR-185可抑制人肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡；机制可能是通过下调 PKM2表达实现。

关键词：肝癌 微小 m2 型丙酮酸激酶 细胞增殖 

单位：公安边防部队总医院; 广东深圳518029; 湖南师范大学附属湘南医院