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EBLN2基因对肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制

魏岩冰; 韩泽广 山东医药 2016年第41期

摘要:目的:探讨人类内源性非逆转录博纳病毒样核蛋白序列2(EBLN2)基因对肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法采用实时定量 RT-PCR 技术和蛋白印迹技术检测 EBLN2基因在肝癌细胞系(HepG2、SK-hep-1、Huh7、Hep3B、MHCC-97H、PLC /PRF /5、Focus、SMMC7721、YY-8103、LO2)和人肝癌组织样本中的表达;选取 EBLN2表达水平较低的肝癌细胞株 Focus 和 YY-8103进行外转质粒过表达,Pcmv-EBLN2重组质粒转入肝癌细胞株 Focus和 YY-8103,24 h 观察 EBLN2基因过表达对肝癌细胞株细胞增殖、平板克隆形成能力及软琼脂克隆形成能力、细胞周期的影响。结果定量和半定量 PCR 实验结果表明 EBLN2基因在59%的肝癌样本中表达下调,且在10株肝癌细胞系(HepG2、SK-hep-1、Huh7、Hep3B、MHCC-97H、PLC /PRF /5、Focus、SMMC7721、YY-8103、LO2)中表达水平与正常肝组织相比明显下调,依次下调48%、73%、72%、79%、84%、72%、87%、74%、82%、80%,P 均<0.05;Pcmv-EBLN2质粒转染肝癌细胞株 YY-8103和 Focus 24 h 后,肝癌细胞株 YY-8103和 Focus 的细胞增殖率分别为72.2%、85.0%,平板克隆形成率分别为52.6%、25.6%,软琼脂克隆形成率分别为40.9%、37.5%,与空白对照相比,P 均<0.05;肝癌细胞株 YY-8103和 Focus 从 G1期进入 S 期受到抑制。结论 EBLN2基因在肝癌组织中表达下调,其可能通过调节细胞周期抑制肝癌细胞增殖。

关键词:肝细胞癌抑癌基因细胞增殖

单位:上海交通大学医学院附属瑞金医院; 上海200025; 国家人类基因组南方研究中心; 上海交通大学系统生物医学院

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