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黄芩素、LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响

汪枫; 喻小兰; 夏纪毅; 王晓燕; 唐利; 曹勇; 唐小平; 夏国栋 山东医药 2016年第41期

摘要:目的:探讨黄芩素和 PI3K 特异性抑制剂 LY294002对人肝癌细胞系 SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养 SMMC-7721细胞,20μmol/L DMSO 及0、1、5、10、20μmol/L 黄芩素分别处理 SMMC-7721细胞,显微镜观察细胞数量变化;20μmol/L DMSO 及0、1、2、5、10、20、50、100、200和300μmol/L 黄芩素和0、1、2、5、10、20、30μmol/L 的 LY294002处理 SMMC-7721细胞24 h,CCK8法检测细胞增殖活性。将 SMMC-7721细胞随机分为4组,A 组加入0μmol/L 黄芩素;B 组加20μmol/L DMSO;C 组加20μmol/L 黄芩素;D 组加20μmol/L 黄芩素和10μmol/L LY294002,培养24 h,流式细胞术检测细胞周期并计算细胞凋亡比例、RT-PCR 法和 Western blotting法检测凋亡相关因子 Bcl-2、Bax mRNA 和蛋白表达及 p-AKT 活性。结果 SMMC-7721细胞数量随黄芩素/LY294002浓度增加而显著减少,细胞增殖活性明显降低(P 均<0.05)。与 A、B 组相比,C、D 组的 G0~G1期细胞比例明显增多(P <0.05),S 期细胞比例明显下降,G2/M期细胞变化无统计学意义(P >0.05),C、D 组 G0~G1期细胞升高比例、S 期细胞降低比例比较,P <均0.05。与 A 组和 B 组相比,C、D 组早期凋亡和晚期凋亡细胞均明显增多(P 均<0.05),D 组比 C 组早期凋亡和晚期凋亡细胞增多更明显(P <0.05)。与 A、B 组相比,C、D 组抑制凋亡因子 Bcl-2 mRNA 水平显著降低(P <0.05),凋亡促进因子 Bax mRNA 水平显著增高(P <0.05);D 组 Bcl-2 mR-NA 水平比 C 组降低更明显,而 Bax mRNA 水平比 C 组升高更明显(P 均<0.05)。与 A、B 组相比,C、D 组凋亡抑制因子 Bcl-2表达量和 AKT 磷酸化水平显著降低(P 均<0.05),凋亡促进因子 Bax 表达量显著增高(P 均<0.05),D组凋亡抑制因子 Bcl-2表达量和 AKT 磷酸化水平降低比 C 组更明显(P 均<0.05),凋亡促进因子

关键词:肝癌黄芩素磷酸肌醇3激酶抑制剂

单位:西南医科大学附属医院; 四川泸州646000; 西南医科大学附属中医医院; 西南医科大学肿瘤研究所

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