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Prohibitin1基因沉默对人黑色素瘤细胞铺展、迁移及侵袭的影响

毕佳佳 山东医药 2016年第46期

摘要:目的:探讨RNA干扰(RNAi)沉默抗增殖蛋白Prohibitin1(PHB)基因对人恶性黑色素瘤A375细胞铺展、迁移和侵袭的影响。方法利用RNAi 技术,将A375细胞分为对照组和观察组,对照组给予含10%FBS 的DMEM培养,观察组加入脂质体Lipofectamine2000和PHB siRNA,均孵育24 h。采用RT-PCR法检测两组细胞中PHB mRNA的表达,Western blot法检测两组细胞中PHB蛋白的表达,铺展实验检测两组细胞在30、60、120 min铺展进程中的铺展情况,划痕实验检测两组细胞的迁移能力,Transwell侵袭实验检测两组细胞的侵袭能力。结果观察组细胞中PHB mRNA及蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.01)。铺展30、60及120 min时,观察组发生铺展的相对细胞数均均少于对照组(P均<0.01)。划痕后12、24 h,观察组细胞迁移面积均少于对照组(P均<0.01)。观察组细胞的侵袭能力小于对照组细胞(P<0.01)。结论 PHB基因沉默可有效抑制黑色素瘤细胞的铺展、迁移和侵袭进程。

关键词:抗增殖蛋白黑色素瘤细胞铺展细胞迁移侵袭

单位:新乡医学院生命科学技术学院; 河南新乡453003

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