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氟及7-NI共培养的SH-SY5Y细胞nNOS表达、增殖情况观察

邓明芬; 朱丹; 桂传枝; 官志忠 山东医药 2017年第11期

摘要:目的观察氟及神经型一氧化氮合成酶(nNOS)特异性抑制剂7-硝基吲唑(7-NI)共培养的SH-SY5Y细胞增殖情况和nNOS表达变化。方法将体外培养SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、7-NI组、低氟+7-NI组、高氟+7-NI组,每组6个复孔。低氟组加入0.2 mmol/L Na F,高氟组加入2.0 mmol/L Na F,7-NI组加入1μmol/L 7-NI,低氟+7-NI组加入0.2 mmol/L Na F和1μmol/L 7-NI,高氟+7-NI组加入2.0 mmol/L Na F和1μmol/L 7-NI,对照组加入等体积培养液,继续培养24 h。采用CCK-8法检测各组SH-SY5Y细胞增殖情况(以OD450表示);采用实时荧光定量PCR法检测各组SH-SY5Y细胞NOS mRNA;采用Western blotting法检测各组SH-SY5Y细胞NOS蛋白。结果低氟组、高氟组细胞OD450均低于对照组(P均〈0.05),且高氟组细胞OD450低于低氟组(P〈0.05);7-NI组细胞OD450与对照组相比P〉0.05;低氟+7-NI组细胞OD450高于低氟组(P〈0.05);高氟+7-NI组细胞OD450高于高氟组(P〈0.05)。低氟组、高氟组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组(P均〈0.05),且高氟组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均高于低氟组(P均〈0.05);7-NI组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(P均〈0.05);低氟+7-NI组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均低于低氟组(P〈0.05);高氟+7-NI组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均低于高氟组(P〈0.05)。结论氟可以抑制SHSY5Y细胞增殖,7-NI共培养可以减轻氟对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用。

关键词:氟中毒人神经母细胞瘤细胞神经型一氧化氮合成酶一氧化氮

单位:贵州医科大学病理学教研室; 贵阳550004; 贵州省肿瘤医院; 贵州省分子生物学重点实验室

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