摘要：目的观察腹腔注射雷帕霉素的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠脊髓神经元病理变化,并探讨其机制。方法将45只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和观察组,各15只。对照组不作任何处理。模型组和观察组制备EAE模型。观察组小鼠腹腔注射雷帕霉素0.75 mg/（kg·d）,2 d后再注射百日咳菌稀释液0.5m L,满18 d后处死。取脊髓组织行尼氏染色,光镜下观察病理变化。采用DCF化学荧光法检测脊髓组织匀浆活性氧簇（ROS）水平。采用Western blotting法检测各组小鼠自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Akt/mTOR/P70s6k信号通路蛋白p-Akt、p-mTOR。结果光镜下观察模型组小鼠脊髓神经元尼氏小体体积变小、数量减少及颜色变浅,排列松散,胞体与轴突轮廓模糊。与模型组相比,观察组小鼠脊髓神经元内排列较整齐,尼氏小体数量及体积均增多,胞体与轴突轮廓模糊现象少见。对照组、模型组、观察组小鼠脊髓组织匀浆ROS含量分别为（43.34±2.67）、（84.22±3.15）、（64.10±3.59）U/mgprot。模型组小鼠脊髓组织匀浆ROS含量高于对照组（P〈0.05）;观察组小鼠脊髓组织匀浆ROS含量高于对照组（P〈0.05）,低于模型组（P〈0.05）。对照组、模型组、观察组小鼠脊髓组织自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ条带光密度值分别为0.486±0.021、0.251±0.032、0.566±0.054。小鼠脊髓组织自噬标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ条带光密度值观察组高于模型组,模型组低于对照组,P均〈0.05。模型组小鼠小鼠脊髓组织pAkt、p-mTOR条带光密度值高于对照组,P均〈0.05;观察组小鼠小鼠脊髓组织p-Akt、p-mTOR条带光密度值低于对照组和模型组,P均〈0.05。结论腹腔注射雷帕霉素的EAE小鼠脊髓神经元病理变化程度减轻。这可能是由于雷帕霉素可抑制AKT/mTOR/P70s6k通路激活自噬活性,清除ROS抑制氧化应激。

关键词：雷帕霉素 实验性自身免疫性脑脊髓炎 细胞自噬 氧化应激 

单位：西南医科大学附属医院; 四川泸州646000