摘要:目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对髓样相关蛋白8(MRP8)/髓样相关蛋白14(MRP14)诱导小鼠胚胎成纤维细胞凋亡的影响。方法制备MRP8、MRP14、MRP8/14备用。分别取p38^+/+和p38^-/-细胞,随机分为空白对照组、MRP8组、MRP14组、MRP8/14组。MRP8组、MRP14组、MRP8/14组分别加入50μg/m L MRP8、MRP14和MRP8/14。空白对照组加入等体积的DMEM培养液。各组干预24、48 h,采用MTT法检测p38^+/+和p38^-/-细胞活力。采用流式细胞术检测空白对照组及MRP8/14干预24、48 h组p38^+/+和p38^-/-细胞凋亡率。采用MTT法检测空白对照组、MRP8/14组以及TLR4受体抑制剂TAK242或RAGE中和抗体处理的MRP8/14(分别设为MRP8/14+TAK242组、MRP8/14+RAGE组)干预24 h p38^+/+细胞活力。采用MTT法和流式细胞术检测空白对照组、MRP8/14组以及p38激酶抑制剂SB203580处理的MRP8/14(设为MRP8/14+SB203580组)干预24 h p38^+/+细胞活力和凋亡率。采用Western blotting法检测MRP8/14干预0、1、2、4、6、8 h p38^+/+细胞p38 MAPK磷酸化。结果 MRP8组、MRP14组、MRP8/14组干预24、48 h p38^+/+、p38^-/-细胞活力均低于空白对照组(P均〈0.05),但无论MRP8/14组干预24 h还是48 h,p38^-/-细胞活力明显高于p38^+/+细胞(P均〈0.05)。MRP8/14干预24、48 h组p38^+/+细胞凋亡率均高于空白对照组,且MRP8/14干预48 h组细胞凋亡率更高(P均〈0.05);而MRP8/14干预24、48 h组p38^-/-细胞凋亡率均未见明显变化(P均〉0.05)。MRP8/14组、MRP8/14+RAGE组干预24 h p38^+/+细胞活力低于空白对照组、MRP8/14+TAK242组干预24 h(P均〈0.05)。MRP8/14+SB203580组干预24 h p38^+/+细胞活力较MRP8/14组干预24 h明显升高,细胞凋亡率较MRP8/14组干预24 h明显降低(P均〈0.05)。MRP8/14干预2、4、6 h p38^+/+细胞p38 MAPK磷酸化水平明显高于干预0、1、8 h(P均〈0.05)。结论 p38 MAPK能促进MRP8/14诱导�
关键词:胚胎成纤维细胞 髓样相关蛋白8 髓样相关蛋白14 p38丝裂原活化蛋白激酶 细胞凋亡
单位:南方医科大学病理生理学教研室; 广东省蛋白质组学重点实验室; 广州510515
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