摘要：目的探讨α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法培养人肾小管上皮细胞,分为低糖组、高糖组和干扰组。干扰组将α-SMA siRNA转染至肾小管上皮细胞中,高糖组、低糖组细胞均不进行α-SMA转染。转染完成后,高糖组、干扰组细胞用高糖DMEM细胞培养液培养,低糖组细胞用低糖DMEM细胞培养液培养,均培养48 h。采用MTT法检测细胞增殖情况。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率。采用Western blotting法检测细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Toll样受体4（TLR4）、核因子-κB（NF-κB）蛋白表达,采用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）法检测细胞中ROS水平,采用ELISA法检测上清液TNF-α、IL-8水平。结果高糖组、干扰组细胞增殖能力均低于低糖组（P均〈0.01）,干扰组细胞增殖能力高于高糖组（P〈0.01）。高糖组、干扰组细胞凋亡率均高于低糖组（P均〈0.01）,干扰组细胞凋亡率低于高糖组（P〈0.01）。高糖组、干扰组细胞Caspase-3、Bax、TLR4、NF-κB蛋白表达均高于低糖组（P均〈0.01）,干扰组细胞Caspase-3、Bax、TLR4、NF-κB蛋白表达均低于高糖组（P均〈0.01）。高糖组、干扰组细胞中ROS水平及上清液TNF-α、IL-8水平均高于低糖组（P均〈0.01）,干扰组细胞中ROS水平及上清液TNF-α、IL-8水平均低于高糖组（P均〈0.01）。结论干扰α-SMA后能够逆转高糖对肾小管上皮细胞的增殖抑制和凋亡促进作用,其机制可能与降低细胞内ROS水平及抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

关键词：糖尿病肾病 细胞增殖 细胞凋亡 炎症因子 

单位：天津市第五中心医院; 天津300451