摘要:目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)A1762T/G1764A双突变对肝癌细胞生物钟基因表达的影响。方法将Bel-7404细胞接种于6孔板中,待细胞生长至60%融合时按照Lipofectamine2000的说明书分别将1.0μg的pc DNA3.1-HBx和pc DNA3.1-mHBx(A1762T/G1764A双突变)质粒转染肝癌细胞系Bel-7404细胞。采用Realtime PCR和Western blotting法检测Bel-7404细胞中CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、CKIεmRNA及蛋白表达。结果与转染pc DNA3.1-HBx相比,转染A1762T/G1764A双突变的pc DNA3.1-mHBx表达载体后Bel-7404细胞中Clock、Bmal1、Per2、Per3、Cry1、Cry2 mRNA和蛋白表达均降低(P均〈0.05)。结论 HBx A1762T/G1764A双突变可引起肝癌细胞生物钟基因表达紊乱。
关键词:肝肿瘤 乙型肝炎病毒x蛋白 突变 生物钟 钟控基因
单位:华中科技大学同济医学院附属梨园医院; 武汉430077; 华中科技大学同济医学院附属协和医院; 贵州医科大学附属医院
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