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SphK1高表达肝癌细胞株的筛选及PF-543对其增殖能力的影响

杨芳; 王欣; 苑永辉; 黄居梅; 郭瑞娟 山东医药 2018年第13期

摘要:目的检测鞘氨醇激酶-1(Sph K1)在正常肝细胞系L02,肝癌细胞Hep G2、Huh7、Bel7402中的表达,筛选Sph K1高表达株,并探讨Sph K1拮抗剂PF-543对其高表达株细胞增殖能力的影响。方法体外培养正常肝细胞系L02,肝癌细胞Hep G2、Huh7、Bel7402,每组设6个复孔,选对数生长期的细胞提取RNA,通过RT-PCR测定各细胞系Sph K1的表达情况;体外培养Sph K1高表达株细胞,分为5组:10-7、10-6、2.5×10-6、10-5mol/L PF-543组及空白组,实验组加入含药培养液,空白组加入等量含0.5%FBS的培养液,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力。简单线性相关分析药物剂量依赖性。结果以正常人肝细胞系L02为参照标准,Hep G2细胞中Sph K1的表达量最高,是正常肝细胞L02中Sph K1表达量的(3.28±0.64)倍(P〈0.01);Huh7细胞中Sph K1的表达量是正常肝细胞L02中Sph K1表达量的(2.07±0.26)倍(P〈0.01),BEL7402细胞中Sph K1的表达量是正常肝细胞L02中Sph K1表达量的(0.22±0.04)倍(P〈0.01);10-6、2.5×10-6、10-5mol/L PF-543组的OD450均低于空白组(P均〈0.01),且具有剂量依赖性。10-7mol/L PF-543对Hep G2细胞增殖未见影响。结论 Hep G2细胞系是Sph K1高表达株,10-6∽10-5mol/L浓度的PF-543可剂量依赖性地抑制Hep G2细胞增殖。

关键词:原发性肝癌

单位:山东省地方病防治研究所; 济南250014; 中国医科大学肿瘤医院·辽宁省肿瘤医院

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