摘要:目的观察串联四价双特异性抗体Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞结合力及对外周血单个核细胞(PBMC)的CD19+血液病细胞杀伤力。方法采用PCR、overlap PCR、酶切、连接等方法构建慢病毒表达载体p LentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19),用p LentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19)瞬时转染293T细胞,提取并纯化Tandab(CD3/CD19)。采用FACS法检测Tandab(CD3/CD19)与CD19+(Raji、Daudi、BJAB)、CD3+(Jurkat)血液病细胞的直接结合力,检测Tandab(CD3/CD19)和抗CD19单克隆抗体HIT19a(或抗CD3单克隆抗体HIT3a)对CD19+、CD3+血液病细胞的竞争结合力。采用乳酸脱氢酶释放法观察Tandab(CD3/CD19)对外周血单个核细胞(PBMC)CD19+血液病细胞杀伤力(以细胞毒性百分比表示)的影响。结果 Tandab(CD3/CD19)可与Raji、Daudi、BJAB、Jurkat直接结合,也可与HIT19a(或HIT3a)竞争性结合Raji、Daudi、BJAB、Jurkat。随Tandab(CD3/CD19)浓度增加,PBMC细胞对Raji、Daudi、BJAB细胞的细胞毒性百分比增加,呈剂量依赖性(P均〈0.05)。结论 Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞具有直接结合力和竞争结合力,并可促进PBMC对CD19+血液病细胞的杀伤力。
关键词:双特异性抗体 串联四价双特异性抗体 靶向杀伤作用
单位:中国医学科学院北京协和医学院血液病医院; 天津300020
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