摘要：目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对乙肝病毒复制的体外抑制作用,并探讨其机制。方法取对数生长期HepG2.2.15细胞,分为A、B、C组。A组、B组分别加入终浓度为40和80μmol/L的EGCG,对照组不作任何处理。培养24 h收集细胞上清,检测各组乙肝病毒e抗原和s抗原,采用real-time PCR法检测各组乙肝病毒DNA。取对数生长期HepG2.2.15细胞,接种于6 cm培养皿,将细胞分为1、2、3、4组。1、2组分别加入终浓度为40和80μmol/L的EGCG,3组加入200 nmol/L的Rapamycin,4组不做任何处理,培养24 h。采用Western blotting法检测各组细胞自噬标记蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、自噬降解相关蛋白p62/β-actin。取对数生长期HepG2.2.15细胞接种于12孔板,将细胞分为空白组、对照组、自噬抑制组（又分为3-MA组和CQ组）。其中,对照组、3-MA组、CQ组又各自分为2组。对照组分别加入终浓度为40和80μmol/L的EGCG处理。3-MA组和CQ组分别先用终浓度为10 mmol/L的3-MA和50μmol/L的CQ预处理半小时,再分别加入终浓度为40和80μmol/L的EGCG。空白组不作任何处理。24 h后收集各组细胞上清,检测各组乙肝病毒e抗原、s抗原和乙肝病毒DNA。结果与C组比较,培养24 h时A、B组乙肝病毒e抗原、s抗原相对量及均乙肝病毒DNA的相对表达量降低（P均〈0.01）。与4组比较,1、2、3组LC3-Ⅱ/Ⅰ均升高,p62/β-actin均降低（P均〈0.01）。与对照组同浓度比较,1、2组乙肝病毒e抗原、s抗原相对量及DNA相对表达量均升高（P均〈0.05）。结论 EGCG可体外抑制乙肝病毒的复制,其机制可能为激活细胞自噬。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯 乙肝病毒 自噬 细胞自噬 

单位：青岛大学基础医学院; 山东青岛266021; 青岛大学附属医院