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转染微小RNA125b抑制序列的三阴性乳腺癌细胞增殖和凋亡变化

聂俊; 江波; 何文杰; 朱颖; 涂长玲; 董坚 山东医药 2018年第19期

摘要:目的观察转染微小RNA125b(miR-125b)抑制序列的三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-468增殖及凋亡情况的变化。方法将MDA-MB-468细胞分为miR-125b抑制序列转染组、无关序列转染组和空白对照组,miR-125b抑制物转染组、无关序列转染组分别转染miR-125b抑制序列和无关序列,空白对照组不转染。转染48 h后采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞中的miR-125b;转染后24、48、72、96、120 h分别采用MTT法观察各组细胞增殖情况(以OD570表示);转染72 h后采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率;各组细胞长至80%-90%汇合时采用Western blotting法检测NF-κBp65和Caspase-3蛋白。结果转染96、120 h时miR-125b抑制序列转染组细胞OD570低于无关序列转染组和空白对照组(P均〈0.05)。转染72 h后miR-125b抑制序列转染组、无关序列转染组和空白对照组细胞凋亡率分别为24.85%±2.21%、1.47%±0.78%和1.32%±0.65%。miR-125b抑制序列转染组细胞凋亡率与无关序列转染组和空白对照组相比,P均〈0.05,无关序列转染组和空白对照组细胞凋亡率相比,P〉0.05。与无关序列转染组和空白对照组相比,miR-125b抑制序列转染组细胞NF-κBp65相对表达量下降(P均〈0.05),Caspase-3相对表达量上升(P均〈0.05)。结论转染miR-125b抑制序列的TNBC细胞MDA-MB-468增殖受到抑制、凋亡增强。这可能与转染miR-125b抑制序列下调MDA-MB-468细胞NF-κBp65和上调Caspase-3蛋白表达有关。

关键词:微小rna微小rna125b三阴性乳腺癌细胞增殖细胞凋亡

单位:云南省肿瘤医院; 昆明650118

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