摘要：目的探讨TNF-α对类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞RUNX3表达的影响及意义。方法从类风湿性关节炎患者滑膜组织中分离并培养原代成纤维细胞,加入不同浓度（0、0.1、1、10、50 ng/m L）TNF-α分别作用0、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR法检测RUNX3 mRNA相对表达量。取传3~8代成纤维细胞,随机分为RUNX3过表达组和对照组,分别感染人源RUNX3腺病毒、绿色荧光蛋白（GFP）对照腺病毒,感染24 h两组均加入50 ng/m L TNF-α再刺激24 h;采用实时荧光定量PCR法检测两组炎性因子[IL-6、前列腺素E2（PGE-2）、趋化因子CXC基序配体9（CXCL-9）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）及MMP-13]表达,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。取传3~8代成纤维细胞,随机分为RUNX3沉默组和对照组,分别采用脂质体转染法转染siRUNX3、NC-control siRNA,转染24 h两组均加入50 ng/m L TNF-α再刺激24 h;采用实时荧光定量PCR法检测IL-6、PGE-2、CXCL-9、MMP-2及MMP-13 mRNA表达。结果成纤维细胞RUNX3 mRNA相对表达量随着TNF-α浓度升高及作用时间延长而逐渐升高,呈浓度和时间依懒性,以TNF-α浓度50 ng/m L、作用时间24 h时RUNX3 mRNA相对表达量上调最为显著（P均〈0.05）。RUNX3过表达组和对照组穿膜细胞数分别为（56±4）、（20±3）个,两组比较P〈0.01。RUNX3过表达组IL-6、PGE-2、MMP-13 mRNA相对表达量均高于对照组（P〈0.05或〈0.01）,两组CXCL-9、MMP-2mRNA相对表达量比较P均〉0.05。RUNX3沉默组IL-6、CXCL-9、MMP-2及MMP-13 mRNA相对表达量均低于对照组（P均〈0.05）,两组PGE-2 mRNA相对表达量比较P〉0.05。结论 TNF-α可促进成纤维细胞RUNX3表达,并呈浓度和时间依赖性;RUNX3表达升高可通过调控IL-6、MMP-13表达而促进成纤维细胞的侵袭能力。

关键词：类风湿性关节炎 滑膜成纤维样细胞 runt相关转录因子3 炎性因子 

单位：济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院; 济南250062