摘要：目的探讨二甲双胍联合顺铂对孕激素耐药子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法将Ishikawa细胞体外培养,取对数期细胞,应用甲羟孕酮诱导建立孕激素耐药体系。取耐药成功的Ishikawa细胞,随机分为5组,二甲双胍组：加入稀释后不同浓度（终浓度为1、2.5、5、10、15 mmol/L）的二甲双胍;顺铂组：加入浓度为5、12.5、25、50、75μmol/L的顺铂;联合用药组：二甲双胍联合顺铂以各自相应的终浓度按1∶200进行给药;对照组：未添加任何药物的无血清培养液处理细胞;空白组：无药物及细胞的培养液。MTT法检测各组细胞增殖抑制率及联合指数（CI）,计算二甲双胍及顺铂的半数抑制浓度（IC-（50））,根据计算的IC-（50）,后续研究中分别用10 mmol/L二甲双胍（二甲双胍组）、60μmol/L顺铂（顺铂组）、10 mmol/L二甲双胍＋60μmol/L顺铂（联合用药组）处理细胞48 h。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法分析相关凋亡基因表达;同时,应用Western blotting法检测各组mTOR信号通路相关蛋白表达。结果二甲双胍在2.5-15 mmol/L、顺铂在12.5-70μmol/L浓度内孕激素耐药的Ishikawa细胞增殖受到抑制,且呈剂量依赖性效应,二者抑制作用随药物浓度的增高而逐渐增大,差异有统计学意义（P均〈0.05）。二甲双胍的IC-（50）为（10.44±0.57）mmol/L、顺铂为（60.22±0.78）μmol/L。联合用药组二甲双胍终浓度为10、15 mmol/L时联合顺铂（对应终浓度为50、75μmol/L）对肿瘤细胞增殖的抑制程度高于二甲双胍组及顺铂组（P均〈0.05）。流式细胞仪结果显示,联合用药组的细胞凋亡率高于顺铂组、二甲双胍组,差异有统计学意义（P均〈0.05）;实时荧光定量PCR及Western blotting结果表明联合用药组Bcl-2相对表达产物含量最低,其p-AMPK蛋白表达较二甲双胍组、顺铂组增加,而p-mTOR含量则降低（P均〈0.05）�

关键词：子宫内膜癌 二甲双胍 顺铂 孕激素 mtor信号通路 

单位：徐州医科大学附属连云港第一人民医院; 江苏连云港222000