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miR-1268重组慢病毒质粒构建及其在人前体脂肪细胞中的表达验证

周雨森; 徐广峰; 赵亚萍; 汪春晖 山东医药 2018年第34期

摘要:目的 构建miR-1268重组慢病毒质粒,观察其在人前体脂肪细胞HPA中的表达情况。方法 从NCBI Gen Bank数据库查找miR-1268的DNA序列,用Primer 5.0软件设计PCR引物,以HPA细胞的DNA为模板进行PCR扩增;克隆慢病毒表达载体,进而包装成空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒;HPA细胞分别感染空载慢病毒和miR-1268过表达慢病毒,荧光定量PCR检测miR-1268表达水平。结果 测序结果表明,miR-1268前体序列与Gen Bank上的序列完全相同。与空载慢病毒感染的HPA细胞比较,miR-1268过表达慢病毒感染的HPA细胞miR-1268上调2.5倍。结论 成功构建miR-1268重组慢病毒质粒,感染的HPA细胞高表达miR-1268。

关键词:微小核糖核酸1268慢病毒载体肥胖症人前体脂肪细胞

单位:蚌埠医学院研究生院; 安徽蚌埠233000; 中国人民解放军第八二医院

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