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基质金属蛋白酶2基因野生型和G1207A突变型质粒构建与鉴定

罗家明; 朱红; 张微; 王成芳; 陈蓉 山东医药 2018年第34期

摘要:目的 为研究基质金属蛋白酶2(MMP2)基因的功能,构建MMP2基因野生型与G1207A突变型质粒。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)及定点突变技术扩增MMP2野生型基因、携带突变位点G1207A的MMP2基因,分别克隆入p UC57质粒中,进行DNA限制性内切酶谱和质粒测序鉴定。结果 MMP2基因野生型与G1207A突变型PCR扩增产物长度均为3 416 bp,与理论值相符;重组质粒p UC57-MMP2、p UC57-p.Arg403His经DNA限制性内切酶谱和基因测序鉴定,MMP2基因野生型碱基序列与Gen Bank(NC_000016.10)上序列完全相同,G1207A突变型除1 207位碱基G被A取代外,其他序列与MMP2基因野生型序列完全相同。结论 成功构建了p UC57-MMP2野生型和p UC57-p.Arg403His突变型质粒。

关键词:基质金属蛋白酶2基因基因突变质粒构建图谱鉴定

单位:川北医学院附属医院; 四川南充637100; 川北医学院; 武胜县人民医院

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