摘要：目的探讨改良联合酶消化法是否能稳定提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞。方法 6只C57成年小鼠拉颈处死后取心脏,然后采用改良联合酶消化法即用胰酶、Ⅱ型胶原酶于37℃恒温箱内消化心脏组织6 min,加血清终止消化,然后将含有细胞的消化液冰上储存,离心提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞,传代后采用苏木素-伊红染色及免疫荧光法检测波形蛋白、盘状结构域受体2进行形态学和免疫学鉴定。结果采用改良联合酶消化法可以稳定地提取贴壁细胞。苏木素-伊红染色可见细胞呈梭形,贴壁生长;经免疫荧光鉴定,所提取的细胞波形蛋白、盘状结构域受体2表达阳性。结论改良联合酶消化法可以稳定地提取成年小鼠原代心脏成纤维细胞。

关键词：组织细胞提取法 改良联合酶消化法 心脏成纤维细胞 原代培养 成年小鼠 

单位：民航总医院; 北京100123; 北京积水潭医院; 首都医科大学宣武医院