摘要:为长期稳定保存银条种质,建立了玻璃化法超低温保存其茎尖的技术体系。选择继代4次的银条无菌壮苗,5℃低温驯化14d;剥取5mm的茎尖,在含有0.5mol.L^-1蔗糖的MS(无Ca^2+)液体培养基预培养1d;25℃条件下经改良MS+2PVS2装载20min;在-20℃,95%乙醇浴中以PVS2脱水处理4h;更换新鲜的PVS3后投入液氮,保存24h后取出冷冻管在40℃水浴中化冻1min;以含有1.2mol.L^-1蔗糖的改良MS(无Ca^2+)溶液洗涤2次,每次10min;冻存后的茎尖相对存活率超过70%。将冻存后的茎尖转接到再生培养基上,暗培养20d后转入正常光照条件下培养,存活率达63.7%;继续培养得到正常分化和生长的再生植株,生根后可移栽成活。
关键词:银条 玻璃化法 茎尖 超低温保存 植株再生
单位:河南农业大学园艺学院 郑州450002
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