摘要：以内蒙古呼和浩特市近郊野生马蔺DNA为模板,采用均匀设计,通过5因素5水平和5因素3水平两轮均匀优化试验,对影响ISSR-PCR扩增结果的一些因素（Mg2＋、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶和模板DNA浓度等）进行优化筛选,建立了适合马蔺的最佳ISSR-PCR反映体系：在25μl反应体系中,包括2.5μl 10×PCR Buffer、2.0mmol/L Mg^2＋、2.5μmol/L dNTP、1μmol/L引物1、.5U TaqDNA聚合酶、50ng模板DNA。在此基础上对扩增程序中的循环次数、退火温度进行筛选,获得的扩增程序为：94℃预变性3min;然后进行40个循环（94℃变性45s,52.3～60.5℃退火30s,72℃延伸1.5 min）;循环结束后,72℃延伸5min。

关键词：马蔺 均匀设计 

单位：中国农业科学院研究生院; 北京100081; 中国农业科学院草原研究所／农业部草原资源与生态重点开放实验室; 内蒙古呼和浩特010010; 内蒙古农业大学生态环境学院; 内蒙古呼和浩特010019