摘要：目的了解碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）耐药基因与毒力基因的分布及分子流行病学特征。方法收集2015年上海地区两所教学医院临床分离非重复的84株CRKP,采用纸片扩散法检测其对15种抗菌药物耐药表型,黏液丝试验检测高黏液表型,聚合酶链反应（PCR）及测序分析常见的碳青霉烯类耐药基因（blaKPC-2、blaNDM、blaIMP、blaOXA、blaVIM）与毒力基因（rmpA、mrkD、entB、ybtS、magA、iutA、allS、kfu）,多位点序列分型（MLST）方法进行克隆分型,eBURST软件对克隆分型结果进行种群结构分析。结果 84株CRKP除对环丙沙星及阿米卡星耐药率分别为77.4%（65株）和82.1%（69株）外,对其他抗菌药物耐药率高,均在90%以上,对亚胺培南、美罗培南、厄他培南耐药率均为100%。黏液丝试验阳性2株。PCR测序显示92.9%（78株）CRKP携带碳青霉烯类耐药基因,其中blaKPC-2的阳性率为90.5%（76株）,分别检出1株blaNDM、blaIMP阳性菌株,未检出blaOXA和blaVIM。毒力基因mrkD、ybtS和entB分别为97.6%（82株）、92.9%（78株）和100%（84株）,其他毒力基因阳性率较低。MLST分为8个ST型,以ST11为主,占71株（84.5%）,ST15为4株,ST323为4株,2株高黏液表型克隆株均为ST11型。e BURST分析发现84株CRKP中有2个ST群。每个ST群分别包括2个ST型（ST11和ST1869,ST15和ST709）。其他4个ST型都是单个ST型,本研究中71株ST11、4株ST15、4株ST323和1株ST45分别属于CC258、CC15、CC163克隆复合体。结论 CRKP对临床常用抗菌药物呈高度耐药状态,肺炎克雷伯菌多重耐药或广泛耐药主要与菌株携带blaKPC-2有关,CRKP中3种常见毒力基因mrkD、ybtS、entB阳性率高,ST11为该两所医院CRKP的主要ST型。

关键词：肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 基因 多位点序型分型 eburst软件 

单位：上海交通大学医学院附属仁济医院检验科; 上海200127; 上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科; 上海200127; 中国人民解放军第二军医大学附属长征医院检验科