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用等位基因特异性寡核苷酸(ASO)-PCR快速检测抗多菌灵的油菜菌核病菌

李红霞; 周明国 中国农业科学 2004年第09期

摘要:通过3对兼并性引物扩增获得与S.sclerotiorum抗药性相关的,全长1 685 bp,包含4个内元,相应的编码447个氨基酸.该基因与其它6种线状真菌的,氨基酸序列同源性达95.78%~97.66%,但内元数目和大小不同.比较S.sclerotiorum敏感型和抗药性菌株的,发现该基因第1 98位氨基酸由谷氨酸突变为丙氨酸,从而导致田间抗药性的产生.为了快速、准确监测田间抗药性频率,根据S.sclerotiorum,直接以菌核的基因组DNA为模板扩增,所需时间约为6 h,抗药性检出率为100%,与传统菌丝直径法的测定结果相比检测准确率为96%,而传统的检测方法至少需要1~2周.

关键词:等位基因特异性抗多菌灵油菜菌核病菌

单位:南京农业大学植物保护学院,南京210095

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