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家蚕eIF2α全长cDNA克隆及生物信息学分析

高贵田; 陈克平; 姚勤; 徐家萍; 王林玲; 陈慧卿 中国农业科学 2006年第05期

摘要:[目的]克隆家蚕eIF2α全长cDNA,分析家蚕抗BmDNV-Z品系、感性品系eIF2α的点突变.[方法]利用荧光差异显示技术,在易感浓核病毒中国镇江株(BmDNV-Z)的家蚕品系华八中获得感性特异条带G13-1b650,通过电子延伸,设计特异引物验证.[结果]克隆了家蚕eIF2α(BmeIF2α)全长cDNA.其全长为1 100 bp(GenBank登录号:DQ073458),ORF框为999 bp,编码332个氨基酸.BmeIF2α蛋白与草地贪夜蛾eIF2α蛋白同源性高达94.3%.具有保守的磷酸化位点S(51)R(52)R(52)R(54)R(56)K(60)R(63).BmeIF2α有推定的3个蛋白激酶C磷酸化、5个酪氨酸激酶磷酸化、9个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化、3个依赖cAMP与cGMP蛋白激酶磷酸化位点,2个酪氨酸硫酸盐化位点,1个糖基化位点.[结论]家蚕易感品系的eIF2α在113~127位的“H V A E L L H Y E T S E Q S E”为酪氨酸硫酸盐化位点,而完全抗性品系eIF2α发生C378→T突变,导致Ser126→Leu,缺少了113~127位的酪氨酸硫酸盐化位点.

关键词:家蚕荧光差异显示生物信息学分析酪氨酸硫酸盐化

单位:江苏大学生命科学研究院; 镇江212013; 安徽省农业科学研究院蚕桑研究所; 合肥230061

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