摘要：【目的】探索西瓜炭疽病菌（Colletotrichum orbiculare）的分子检测技术，为西瓜、甜瓜等生长期和采后炭疽病的快速、准确鉴定和检测提供技术和方法。【方法】根据GeneBank中Colletotrichum属的24个种ITS序列，比较设计出1对引物CY1／CY2（CY1：5＇-CTTTGTGAACATACCTAACC-3’；CY2：5＇-GGTTTTACGGCAGGAGTG-3’）；进一步利用RAPD随机引物扩增西瓜炭疽菌C.orbiculare和菜豆炭疽菌C.lindemuthianurn，找出在C.orbiculare中的特异性条带，经过克隆、测序后，设计出1对SCAR引物RB／RC。【结果】引物CY1／CY2可以特异的从C.orbiculare和C.lindemuthianum菌株中扩增到1条442bp的条带，将这2个种的炭疽菌和其它炭疽菌种以及其它真菌种分开。引物RB／RC可以特异地在C.orbiculare中扩增出1条216bp条带，将C.orbiculare和C.lindemuthianum分开。采用2对引物组成双重PCR，将C.orbiculare进行特异性扩增，可获得442bp和216bp的2条特异性条带。【结论】利用上述2对引物组成双重PCR检测体系，快速鉴定C.orbiculare，并且能够直接在植物组织中将西瓜炭疽菌C.orbiculare检测出来，灵敏度可以达到1pg·μl^-1。

关键词：西瓜炭疽病 colletotrichum orbiculare 分子检测 双重pcr 

单位：华东理工大学海洋生化工程研究所／生物反应器工程国家重点实验室; 上海200237; 南京农业大学植物保护学院／农业部植物病虫监测与治理重点开放实验室; 南京210095