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ARDRA方法在荧光假单胞菌分离鉴定中的应用

年洪娟; 张杰; 樊利强; 刘朔; 宋福平; 黄大昉 中国农业科学 2007年第01期

摘要:[目的]探索荧光假单胞菌的分类方法,分离筛选拮抗性较强的荧光假单胞菌.[方法]利用紫外下产生荧光的特性,采用梯度稀释及鞭毛染色的方法,对采自云南、海南、山东和新疆的488份植物根际土壤进行分离筛选,分离菌株进行ARDRA分析,采用室内平板对峙法筛选对植物病原真菌具有较强拮抗作用的菌株,并对其进行生理生化分析和分子鉴定.[结果]分离筛选到102株紫外下产生荧光的杆状单极生鞭毛菌株.ARDRA分析产生荧光假单胞菌类型、恶臭假单胞菌类型以及一个未知的谱带类型.以油菜立枯病菌作为靶标菌,筛选到25株具有拮抗作用的菌株,其中TC222产生的抑菌圈最大,进一步的生测结果表明该菌株对9种重要的植物病原真菌如番茄灰霉病菌等具有很强的拮抗活性.TC222的 16S rDNA核苷酸序列与荧光假单胞菌PfO-1同源性达到99%,其最终鉴定为荧光假单胞菌.[结论]ARDRA方法在分子水平上为荧光假单胞菌的分离鉴定探索了一条新途径;TC222菌株具有拮抗多种植物病原真菌的能力,显示了良好的应用前景.

关键词:荧光假单胞菌分离鉴定ardra分析拮抗作用

单位:中国农业科学院植物保护研究所; 植物病虫害生物学国家重点实验室; 北京100094; 中国农业科学院生物技术研究所; 北京100081

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