摘要：[目的]制备高亲和力农药克百威单克隆抗体,建立克百威残留免疫检测方法,控制克百威残留,保障人民身体健康与保护环境.[方法]合成克百威半抗原BFNB,用人工抗原BFNB-BSA免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA筛选及显微克隆法亚克隆,分离出阳性细胞株,腹水诱导法及辛酸-硫酸铵沉淀法大量制备及纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定抗体滴度及亲和力,间接竞争ELISA法测定抗体特异性.[结果]获得1株稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株5D3,其培养上清和腹水抗体滴度分别为1﹕2.048×10^3和1﹕1.024×10^6,其抗体亚类为IgG1,亲和力常数为2.54×10^9 L·mol^-1,IC50为1.18 ng·ml^-1,最低检测限为0.01 ng·ml^-1.与克百威降解产物呋喃酚的交叉反应率为4.59×10^-4%,另外几种结构类似的氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于3.0×10^-4%.[结论]此抗克百威的单克隆抗体亲合力高、特异性强,为建立克百威简便、快速、特异的免疫检测方法奠定了基础.

关键词：克百威 单克隆抗体 免疫化学分析 

单位：广东省教育厅食品质量与安全重点实验室/华南农业大学食品质量安全研究所; 广州510642