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昆虫抗真菌肽基因的分泌型表达及活性鉴定

桑延霞; 邓小娟; 杨婉莹; 刘文权; 王文献; 黄亚东; 曹阳 中国农业科学 2007年第04期

摘要:[目的]黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)抗真菌肽Drosomycin (Drs)及其同系物Drosomycin-like C (Drs-lC)和斑腹刺螠蝽(Podisus maculiverntris)抗真菌肽Thanatin对丝状真菌具有广谱高效的抑杀作用.实现抗真菌肽基因在酵母中的高效分泌型表达,对探讨利用转基因酵母的发酵液直接进行果蔬、食品和农产品防腐保鲜的生物技术研发有重要意义.[方法]将Drosomycin基因(Drs)及其同系物基因Drs-lC和Thanatin基因分别与酵母分泌型表达载体pPICZαA重组,构建成重组表达质粒pPICZαA-Drs、pPICZαA-Drs-lC和pPICZαA-Thanatin.利用电转化将重组质粒转化毕赤酵母GS115,经表型筛选和PCR鉴定获得的重组毕赤酵母转化子,在甲醇诱导下进行抗真菌肽的分泌表达.[结果]3种抗真菌肽基因的酵母表达产物对6个供试真菌中的5个有明显的抑制作用,Thanatin同时对供试细菌有抗菌活性.[结论]Drs、Drs-lC和Thanatin抗真菌肽基因成功地转化毕赤酵母,并实现其分泌型表达.

关键词:昆虫抗真菌肽毕赤酵母分泌型表达抗真菌活性鉴定

单位:华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系; 广州510642; 西南大学农业部蚕桑学重点实验室; 重庆400716; 华南农业大学资源环境学院; 昆虫学系; 广州510642; 曁南大学医药生物技术研究开发中心; 广州510632

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中国农业科学

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