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PCR法快速检测扩张青霉

樊明涛 毕静莹 Mansel W Graffith Wang Haifeng 中国农业科学 2008年第01期

摘要:【目的】研究棒曲霉素扩张青霉菌(Penicillium expansum)的快速和特异性PCR检测方法。【方法】通过P.expansum的纯菌平板和液体培养以及纯菌接种于苹果、苹果果肉和苹果汁,用Cenis改良方法提取DNA,以基于isoepoxydon dehydrogenase和polygatacturonase编码基因的两对引物扩增P。 expansum DNA,建立特异和快速的检测P.expansum的方法。【结果】基于polygatacturonase基因的引物具有很强的特异性,只有目标DN段被扩增,而基于isoepoxydon dehydrogenase基因的引物扩增特异性较差。纯培养可以检测到5×10^-6μgDNA/每反应体系,整个检测时间约为5h,比传统培养法(4~6d)时间大大缩短。苹果、苹果果肉和果汁接种纯P.expansum后所提DNA都得到了很好的扩增,具有很高的特异性,不受苹果样品DNA的干扰。【结论】本研究建立的P.expansum的PCR检测方法特异、快速、灵敏,可用于商品果汁和苹果汁工业化生产中P.expansum的快速检测和质量控制,也可用于工艺过程对P.expansum污染的快速溯源。

关键词:苹果扩张青霉pcr快速检测

单位:西北农林科技大学食品科学与工程学院 中国陕西杨凌712100 Canadian Research Institute for Food Safety and Food Science Department University of Guelph Guelph Ontario N1G 2W1 Canada

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