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转录因子ABP9转化大豆(Glycine max L.)及遗传转化条件优化

王昌陵 赵军 李英慧 范云六 张丽娟 刘章雄 关荣霞 吕淑霞 常汝镇 邱丽娟 中国农业科学 2008年第07期

摘要:【目的】将抗逆相关转录因子ABP9基因导入大豆(Glycine max L.)基因组,并对转化系统条件进行探索,为提高大豆遗传转化效率提供依据。【方法】以农杆菌介导的半种法大豆遗传转化系统为基础,对目的基因进行转化;以健康外植体获得率、抗性丛生芽获得率和抗性芽伸长比率为指标,对转化系统条件进行优化。【结果】共培养时保证充足的光照和氧气,外植体生长情况最好;在共培养或诱导丛生芽培养基中加入600mg·L^-1的L-半胱氨酸可以使抗性丛生芽获得率由22.1%提高至32.6%;采用4种植物激素进行正交试验,诱导抗性芽伸长比率最高的激素配比为:6-BA为1.5mg·L^-1,GA3为0.75mg·L^-1,IAA为0.1mg·L^-1,ZT为1.0mg·L^-1。【结论】利用优化的方法进行遗传转化研究已获得转基因再生植株,经PCR和DNA测序等分子检测,证明目的基因ABP9已导入并整合到大豆基因组中;转化率为1.33%。

关键词:遗传转化abp9半种法条件优化

单位:沈阳农业大学生物科学技术学院 沈阳110161 国家农作物基因资源与遗传改良重大科学工程/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室 北京100081 中国农业科学院作物科学研究所 北京100081 中国农业科学院生物技术研究所 北京100081

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