摘要：【目的】获得抗川楝素的高灵敏度，高特异性多克隆抗体，建立川楝素的问接竞争酶免疫测定（IC-ELISA）方法。【方法】采用酯化反应合成川楝素的半抗原并经HRMS，NMR及IR鉴定；用混合酸酐法和活化酯法分别合成人工免疫抗原与包被抗原；通过免疫动物获得多克隆抗体。【结果】合成了琥珀酸单酰川楝素（TS）和戊二酸单酰川楝素（TG）2种半抗原，与载体蛋白BSA和OVA分别偶联制备了2种免疫原TS-BSA和TG-BSA，及2种包被原Ts-OVA和TG-OVA。免疫后获得的2种抗体效价达6．4×10^4和3．2×10^5。经4种不同包被原-抗体组合优化，以（TS-Ab，TG-OVA）组合建立的川楝素IC-ELISA检测方法，线性检测范围为0．01-100μg．ml^-1，检测限达0．03μg．ml^-1，抑制中浓度为1．52μg．ml^-1；以（TG-Ab，TG-OVA）组合建立的方法，线性检测范围为0．1-100μg．ml^-1，检测限达0．11μg．ml^-1，抑制中浓度为3．49μg．ml^-1。水样中基于（TS-Ab，TG-OVA）组合的川楝素平均回收率为82．4％-106.0％，精密度为1．1％-14．3％。【结论】通过川楝素半抗原的合理设计，获得了高效价的抗川楝素多克隆抗体，建立了快速有效的川楝素IC-ELIsA检测方法。

关键词：川楝素 半抗原 多克隆抗体 elisa 

单位：西北农林科技大学无公害农药研究服务中心 陕西杨凌712100 陕西省生物农药工程技术研究中心 陕西杨凌712100 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究中心 江苏南京210014