摘要：【目的】检测湖南地区柑橘所携带的柑橘类病毒类型,并鉴定柑橘类病毒的亚型。【方法】以田间柑橘枝条韧皮部为试材,提取总RNA,反转录成cDNA,再用不同类型类病毒的特异引物进行PCR扩增,鉴定出各个样品所携带的柑橘类病毒类型;通过测序分析各类型的序列,并与国内外报道的序列进行同源性分析,确定所测样品的亚型。【结果】建立了CEVd、CVdII、CVdⅢ等柑橘类病毒的RT-PCR检测方法。在5个供试样品中检测出3种类型的柑橘类病毒,即柑橘裂皮病类病毒（citrus exocortis viroid,CEVd）、柑橘类病毒Ⅱ型（citrus viriodⅡ,CVdⅡ,又名hop stunt viroid,HSVd）和柑橘类病毒Ⅲ型（citrus viriodⅢ,CVdⅢ）,其中CVdⅡ和CVdⅢ为国内首次发现。亚型分析表明CVdⅡ可能为新的亚型;CVdⅢ为b亚型,可能具有矮化功能。【结论】在中国鉴定出3种类型的柑橘类病毒,CEVd与国内已报道的序列完全一致,其中CVdⅡ和CVdⅢ为首次在中国发现;检测到的CVdⅡ可能为新的亚型。

关键词：柑橘 类病毒 检测 序列分析 分型 

单位：湖南农业大学园艺园林学院 长沙410128 国家柑橘改良中心长沙分中心 长沙410128 Department of Phytosanitary Sciences and Technologies University of Catania Italy