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山药SuSy基因全长cDNA序列的结构、进化和表达

周生茂 曹家树 王玲平 向珣 韦本辉 李杨瑞 方锋学 李文嘉 中国农业科学 2009年第07期

摘要:【目的】阐明山药蔗糖合成酶(SuSy,EC2.4.1.13)基因家族的成员及其功能。【方法】利用RT-PCR和RACE技术从大薯(Dioscoreaalata)地下块茎中分离到1个SuSy基因(DaSuSyl)4e长cDNA序列,并用DANSTAR和Clastal W等软件分析该序列的结构特征和分子进化,采用RT—PCR和Northern杂交对该基因的时空表达进行分析。【结果】DaSuSyl全长cDNA序列大小为2673bp,其中最大开放阅读框(ORF)、5’端和Y端的非翻译区分别含有2445bp、7bp和221bp,而且3’端的非翻译区含1个24nt的P01y(A^+)尾;最大ORF可编码814个氨基酸,分子量为92.76kD,等电点为6.42,含有蔗糖合成酶和葡糖基转移酶两个保守功能域及两个磷酸化位点,即N端的Ser^10和C端的SNLDRRET^781 RR(Ser^774~Thr^781)。该基因在全长cDNA序列、编码区cDNA序列及其编码氨基酸序列的水平上与GenBank中所选已知物种SuSy基因相应序列的同源性分别达45.3%~71.3%、45.8%~74.8%和50%~84.7%,与禾本科植物SuSy基因家族中一些成员亲缘关系最近。DaSuSyl在非光合器官中表达,其中地下块茎表达最为强烈,而且从块茎形成初前期开始表达一直增强至盛中期,此后逐渐减弱。【结论】DaSuSyl是山药SuSy基因家族成员,归为单子叶植物SuSy基因的组别,仅在非光合器官中表达编码负责蔗糖-淀粉转化功能的SuSy同工型。

关键词:蔗糖合成酶基因克隆结构特征分子进化表达分析

单位:浙江大学蔬菜研究所 杭州310029 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 南宁530007 浙江省农业科学院蔬菜研究所 杭州310021 广西壮族自治区农业科学院经济作物研究所 南宁530007 广西壮族自治区农业科学院省重点实验室 南宁530007

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