摘要：【目的】利用分子生物学方法探讨5-氮杂胞苷（5-azacytidine，5-Aza）体外诱导牛骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSC）向心肌细胞的分化，为转基因良种肉牛培育提供种子细胞，提高转基因效率。【方法】利用获取的纯化稳定的P4、P8、P12代BMSC各经5、10、15μmol·L^-1的5-Aza进行体外诱导分化，统计并计算心肌细胞的转化率，对诱导出现的心肌样细胞进行形态学观察和RT—PCR鉴定。【结果】诱导后细胞大多呈现梭形，排列方向渐趋一致，有肌管样结构形成。相同代数的BMSC在10μmol·L^-1的5-Aza作用下诱导效果最佳；在相同浓度的5-Aza作用下，BMSC向心肌细胞的转化率随着传代次数的增加逐渐降低。RT—PCR显示诱导分化后的细胞明显表达心肌细胞的4种特异性基因，分别是α-心脏肌动蛋白（378bp）、结蛋白（601bp）、心脏肌钙蛋白T（331bp）、β-肌球蛋白重链（β—MHC）（273bp）。【结论】5-Aza体外可诱导牛骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞；利用P4代BMSC在10μm01·L^-1的5-Aza的作用，诱导效果明显。

关键词：骨髓间充质干细胞 心肌细胞 

单位：青岛农业大学动物胚胎工程中心 山东青岛266109 山东省黑牛繁育工程技术研究中心 山东青岛266109 山东布莱凯特牧业科技有限公司 山东淄博256306