摘要：【目的】在地塞米松（DEX）诱导骨骼肌卫星细胞氧化应激的体外条件下,筛选丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号系统中起关键作用的信号通路。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞（SCs）分别进行处理：Ⅰ、对照组;Ⅱ、DEX;Ⅲ、p38MAPK抑制剂;Ⅳ、DEX＋p38MAPK抑制剂;Ⅴ、JNK抑制剂;Ⅵ、DEX＋JNK抑制剂;Ⅶ、ERK5抑制剂;Ⅷ、DEX＋ERK5抑制剂;Ⅸ、ERK1/2抑制剂;Ⅹ、DEX＋ERK1/2抑制剂。除处理Ⅰ和处理Ⅱ外,其它处理首先用抑制剂预处理30min,弃去培养基后,再按处理设置分别加入含DEX的培养基或者正常培养基继续处理24h。处理结束后,分别测定细胞培养液中丙二醛（MDA）、活性氧自由基（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽硫转酶（GST）含量或活性;同时采用RT-PCR方法检测通路蛋白及SOD与GST基因表达量。【结果】抑制剂单独处理组MDA和ROS的产生量显著低于DEX处理（P〈0.05）;DEX＋ERK5抑制剂处理与DEX＋ERK1/2抑制剂处理的MDA和ROS产生量显著高于ERK5抑制剂处理和ERK1/2抑制剂处理（P〈0.05）;DEX＋p38MAPK抑制剂处理与DEX＋JNK抑制剂处理组的MDA和ROS产生量与p38MAPK处理和JNK处理的差异不显著（P〉0.05）。抑制剂单独处理组的SOD和GST活性比DEX处理高（P〈0.01）;DEX＋ERK5抑制剂处理与DEX＋ERK1/2抑制剂处理的SOD和GST活性极显著低于ERK5抑制剂处理组和ERK1/2抑制剂处理组（P〈0.01）,DEX＋p38MAPK抑制剂处理与DEX＋JNK抑制剂处理的SOD和GST活性与p38MAPK抑制剂处理和JNK抑制剂处理的差异不显著（P〉0.05）。基因表达结果表明,DEX能够抑制GST和SOD基因的表达,抑制率达37%以上。与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38MAPK和JNK通路后,DEX对GST和SOD基因的表达无明显抑制作用。【结论】在DEX诱导的肉仔鸡胸肌骨骼肌SCs产生的氧化应激过程中,p38MAPK和JNK通路起着关键作用。

关键词：氧化应激 骨骼肌卫星细胞 mapk p38 jnk 

单位：中国农业科学院饲料研究所/农业部饲料生物技术重点开放实验室 北京100081 北京师范大学生命科学学院 北京100875