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马铃薯蛋白激酶基因StPK1启动子的克隆及活性分析

吴田 谢从华 中国农业科学 2011年第05期

摘要:【目的】研究马铃薯蛋白激酶基因StPK1,为在马铃薯抗病反应中的功能提供证据。【方法】利用TAIL-PCR技术,从马铃薯晚疫病水平抗性、垂直抗性和感病等3种材料中,分别克隆了该基因的启动子区域。此外,将从水平抗性材料中克隆得到的启动子与GUS连接构建植物表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化法转化本氏烟(Nicotiana benthamiana),将得到的转基因烟草分别用水、晚疫病原菌或水杨酸(SA)溶液处理,并进行表达活性分析。【结果】3个启动子长度分别为922、929和922 bp,均具有TATA-box和CAAT-box以及多种与抗病反应和基因时空表达有关的元件,而三者的主要差异是个别碱基的不同。GUS组织化学染色表明,用晚疫病原菌或SA处理的转基因烟草被染成蓝色。【结论】StPK1启动子为有活性的启动子,且为病原和SA诱导型启动子。

关键词:马铃薯晚疫病stpk1启动子

单位:西南林业大学园林学院 昆明650224 华中农业大学园艺林学学院/园艺植物生物学教育部重点实验室/国家蔬菜改良中心华中分中心/湖北省马铃薯工程技术研究中心 武汉430070

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