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HMC毒素诱导玉米同核C、N细胞质细胞凋亡的荧光显微观察

马春红 李秀丽 董文琦 张红心 李运朝 崔四平 王立安 贾银锁 戴志刚 中国农业科学 2011年第09期

摘要:【目的】研究玉米小斑病菌C小种毒素(HMC-toxin)诱导同核异质体玉米的离体根冠细胞发生凋亡的差异性及凋亡规律。【方法】采用吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)荧光复染以及Hoechst 33258荧光染色的方法检测。【结果】HMC毒素诱导根冠细胞发生凋亡,出现凋亡小体与染色体边集形态特征。在3种毒素浓度、3种处理时间下,Mo17-C的根冠细胞死亡率均高于Mo17-N。采用AO与EB复染方法,在150μg.mL-1HMC毒素处理7 h时,Mo17-C细胞凋亡率达最高值,为68.7%,而Mo17-N仅为29%;经Hoechst 33258染色后,在150μg.mL-1HMC毒素处理下,Mo17-C也于7 h时达最大凋亡率,为57.3%,而Mo17-N为27.7%。【结论】在毒素"伤害"细胞致死过程中,C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质;在"诱导"细胞凋亡程序中,C细胞质的细胞凋亡率也远高于N细胞质的。凋亡率随诱导浓度和诱导时间的增加而增加。AO、EB复染与Hoechst 33258染色相比,两者细胞凋亡率接近,准确度均高,图像清晰,且费用相当,但前者可以区分早期和晚期凋亡细胞而后者不能区分。

关键词:玉米小斑病菌c小种毒素细胞凋亡hoechst33258

单位:河北省农林科学院遗传生理研究所 石家庄050051 河北师范大学生命科学学院 石家庄050016 河北省农林科学院科技处 石家庄050051 唐山师范学院 河北唐山063000 湖北省土壤肥料工作站 武汉430064

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