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抑制钙信号转导对柔嫩艾美耳球虫入侵细胞的影响

郑明学 古少鹏 王丽霞 韩克光 李宝钧 中国农业科学 2011年第15期

摘要:【目的】探讨柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)入侵细胞与钙信号转导之间的关系,揭示鸡柔嫩艾美耳球虫病的发生机制。[方法]采用体外狗肾细胞(madin-darby canine kidneycell,MOCK细胞)培养技术,检测了细胞外缺钙、Ca2+内流阻断剂(硝苯地平)和钙调蛋白抑制剂(三氟拉嗪)对E.tenella子孢子入侵率的影响,并测定了培养细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和细胞活性。【结果】E.tenella子孢子入侵细胞的抑制率随着细胞外Ca2+浓度的降低而升高。钙离子浓度降低到600umol·L-1时,入侵率(23.33%)均极显著低于对照组(P〈0.01);细胞外无钙时,入侵抑制率高达53.18%;硝苯地平和三氟拉嗪均能极显著抑制子孢子的入侵(P〈0.01),其中10umol·L-1的硝苯地平和50umol·L-1三氟拉嗪分别对子孢子的入侵抑制率达71.41%和97.13%,二者合用入侵抑制率可达98.59%。在E.tenella子孢子入侵细胞的过程中,MDCK细胞的活性均在90%以上,与对照组差异不显著(P〉0.05),接种最tenella子孢子的MOCK细胞培养液中LDH的活性与未接种的活性差异不显著(P〉0.05)。【结论】细胞外钙缺乏、钙通道阻断剂硝苯地平和钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪对E.tenella子孢子入侵MOCK细胞均有抑制作用,但子孢子入侵对MDCK细胞的活性无明显影响。

关键词:钙信号转导柔嫩艾美耳球虫子孢子硝苯地平三氟拉嗪

单位:山西农业大学动物科技学院 山西太谷030801

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