摘要：【目的】克隆哈茨木霉几丁质合酶基因全序列，并对序列进行生物信息学分析。【方法】利用多聚酶链式反应（PCR）和染色体步移技术（genome walking）克隆几丁质合酶基因全序列；应用生物信息学软件对获得的基因序列及编码的蛋白序列进行分析；通过同源建模，对蛋白质的三维结构进行预测。【结果】从哈茨木霉（TrichodermaharzianumTh-33）中扩增得到几丁质合酶基因ThChsC（GenBank登录号HQ419000），编码区（CDS）长为2835bp，由4个外显子和3个内含子组成，开放阅读框（ORF）长2688bp，编码895个氨基酸。序列比对和同源性分析显示，该基因与串珠状赤霉（Gibberella moniliformis，ACY08039．1）和禾生刺盘孢菌（Colletotrichumgramiaicola，AAL23718．1）几丁质合酶基因相似性最高，分别为80％和81％；相应的氨基酸序列同源性均为80％，系统进化分析表明，劢珊Jf属于III型几丁质合酶亚家族。几丁质合酶ThChsC含有1个chitin—synth-1结构域，1个Chitin—synth-1N结构域，1个Chitin—synth-2结构域，3个跨膜结构域，不含信号肽，为膜结合蛋白。对预测的三维结构分析表明，ThChsC含有糖基转移酶的保守DHD结构域。【结论】从哈茨木霉Th-33中克隆得到几丁质合酶基因ThChsC,对该基因的深入研究有助于探索哈茨木霉几丁质合成的机制。

关键词：哈茨木霉 几丁质合酶 基因克隆 序列分析 

单位：中国农业科学院植物保护研究所/农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室 北京100081 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 北京100081