摘要：【目的】克隆并分析绵羊Myostatin基因5调控区，并在细胞水平研究孕激素对该调控区活性的影响。【方法】利用PCR方法扩增绵羊Myostatin基因5’调控区，采用Matlnspector等软件分析并比较其和牛、猪调控区的调控元件和转录因子。以EGFP为报告基因，构建表达载体，转染C2C12细胞，同时添加不同剂量的孕激素（0、10、100和1000nmol·L^-1），然后通过RT—PCR方法检测报告基因EGFP和内源性Myostatin的mRNA水平。【结果】获得绵羊约3．2kbMyostatin基因5，调控区（MSTN5，regu），预测了两个对双肌性状可能存在贡献的位点。在绵羊、牛和猪的相应调控区发现了许多可能对该基因转录调控起重要作用的调控元件和相应转录因子，包括E-box、MEF2、MTATA、MTBF、HOMF、PRE、ARE和GRE等。各种元件在不同动物间基本都有，但具体的序列、位置以及数量有所差异。成功构建了绵羊pMSTN5’regu-EGFP表达载体，且转染后100nmol·L^-1孕激素明显抑制了内源性MyostatinmRNA和报告基因EGFPmRNA的表达。【结论】绵羊Myostatin基因的转录受多种转录因子和相应调控元件的调控，适量孕激素可通过下调Myostatin基因5’调控区的活性而抑制该基因的转录。

关键词：绵羊 生物信息学分析 调控元件 转录因子 孕激素 

单位：山西农业大学动物科技学院 山西农业大学信息科学与工程学院分析测试中心 山西太谷030801