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鹿慢性消耗性疾病免疫组织化学检测方法的建立与优化

张鑫鑫 刘焕奇 刘雨田 孙成友 迟田英 于小静 邓明义 王志亮 中国农业科学 2012年第15期

摘要:【目的】在自主研制的抗鹿朊蛋白单克隆抗体基础上,建立和优化了鹿慢性消耗性疾病(chronic wasting disease,CWD)的免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)诊断方法。【方法】按照常规石蜡病理切片制作方法制备阴性和阳性切片,应用ABC法对获得的5株单抗进行免疫组织化学检测。【结果】试验结果表明,5株单抗(编号分别为5A5、3B2、6D12、5E3、1F5)中只有5E3和3B2可以与CWD的阳性鹿延髓切片发生特异性免疫反应,而且5E3的反应较强烈,3B2的反应较弱,其它3株单抗则在试验的浓度范围内无特异性免疫反应。此外,5E3的稀释比例为1:10 000时,免疫反应效果达到最佳状态。【结论】实验结果表明,单抗5E3可以用于我国CWD的监测。

关键词:鹿鹿慢性消耗性疾病单抗免疫组织化学

单位:青岛农业大学动物科技学院 中国山东青岛266109 中国动物卫生与流行病学中心 中国山东青岛266032 美国农业部外来动物疫病诊断实验室 美国纽约11944-0848

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