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鸭β-防御素16的分离、鉴定及其抗病毒机制

张可心 张名岳 辛胜男 韩宗玺 邵昱昊 刘胜旺 马得莹 中国农业科学 2012年第18期

摘要:【研究目的】旨在克隆与表达鸭β-防御素16(AvBDl6)基因及测定其生物学特性,监测了鸭肝炎病毒感染后麻鸭不同组织AvBDl6与TLR-7的动态变化。【方法】采用RT—PCR方法,从鸭骨髓组织中扩增到鸭AvBD16,并将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对其重组和合成蛋白进行生物学活性测定。采用荧光定量PCR方法,分别检测了鸭肝炎病毒对鸭AvBD16和TLR-7在不同组织中表达量的影响。【结果】鸭AvBD16eDNA大小为155bp,编码50个氨基酸残基,与鸡AvBD3氨基酸同源性最高,为62%。重组和合成鸭AvBD16蛋白对12种细菌均有不同程度的抑制作用,高盐浓度对其抗菌活性有一定影响,且溶血活性极低。重组AvBD16蛋白具有体外抗病毒活性。经鸭肝炎病毒诱导后,鸭AvBD16在肝脏及其他组织中被诱导表达或表达量显著上调,且与TLR7的表达量呈正相关。【结论】成功克隆并表达了鸭AvBD16基因,重组和合成AvBD16蛋白具有广谱的抗菌活性且不具有溶血特性。重组AvBD16蛋白具有抗鸭肝炎病毒的活性,体内抗病毒作用可能受TLR-7通路调节。

关键词:鸭avbd16抗菌活性抗病毒活性信号传导

单位:东北农业大学动物营养研究所 哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室 哈尔滨150001

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