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柑橘衰退病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

王永江 周彦 李中安 苏华楠 黄爱军 唐科志 周常勇 中国农业科学 2013年第03期

摘要:【目的】建立一种反转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermalamplification,RT-LAMP)检测柑橘衰退病毒(Ctrus tristeza virus,CTV)的一步法检测技术。【方法】根据CTV保守的p25设计2对特异性引物,对RT-LAMP体系的最佳反应条件、特异性、灵敏度等进行研究。【结果】建立了一种特异性检测CTV的RT-LAMP方法,该方法的灵敏度比RT-PCR方法高100倍,产物通过Acc I酶切得到验证,而且反应产物中加入SYBR Green I可直接观察样品是否感染CTV。【结论】RT-LAMP法检测CTV,其成本低、准确且快速,可满足基层、科研单位等对该病害检测的需要。

关键词:反转录环介导等温扩增技术柑橘衰退病毒反转录聚合酶链式扩增技术检测

单位:中国农业科学院柑桔研究所 重庆400712 河南省农业科学院植物保护研究所 郑州450002 中国农业科学院研究生院 北京100081

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